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      當前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 蛋白與免疫 > 顯色成像 > AP34L034/AP34L035EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級)

      EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級)

      簡(jiǎn)要描述:EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級)可幫助用戶(hù)在免疫印跡分析過(guò)程中實(shí)現飛克級的蛋白檢測(<10-12g),極其節省抗體。West Femo底物可為使用辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗提供明亮的信號和飛克級檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液,以出色性能、通用性和高性?xún)r(jià)比,滿(mǎn)足用戶(hù)的免疫印跡應用需求。

      • 產(chǎn)品型號:AP34L034/AP34L035
      • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
      • 更新時(shí)間:2024-04-17
      • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1634

      詳細介紹

      品牌Life-iLab/李記生物貨號AP34L034/AP34L035
      規格100mL供貨周期現貨
      應用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

      EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級)

      產(chǎn)品描述
      EZ ECL Femo化學(xué)發(fā)光液是一款目前最高靈敏度的增強型化學(xué)發(fā)光(ECL)HRP底物,可幫助用戶(hù)在免疫印跡分析過(guò)程中實(shí)現飛克級的蛋白檢測(<10-15g),極其節省抗體。West Femo底物可為使用辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗提供明亮的信號和飛克級檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液,以出色性能、通用性和高性?xún)r(jià)比,滿(mǎn)足用戶(hù)的免疫印跡應用需求。
      West Femo底物的特點(diǎn):
      • 靈敏度高:檢測硝化纖維素膜或PVDF膜上飛克級的蛋白條帶。
      • 長(cháng)信號持續時(shí)間在條件優(yōu)化情況下,經(jīng)底物孵育的印跡條帶能夠持續輸出 6~8 h 的可檢測光信號。
      試劑穩定:試劑盒在室溫下可穩定放置長(cháng)達6個(gè)月,4℃條件下存放1年不影響使用。
      建議稀釋濃度:
      • 一抗濃度建議1 µg/mL儲存液稀釋1:5,000至1:100,000倍
      • 二抗濃度建議1 µg/mL儲存液稀釋1:100,000至1:500,000倍
      訂購信息
      產(chǎn)品名稱(chēng)貨號規格
      EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級)AP34L034100 mL
      EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液( 飛克級 )AP34L035500 mL
      產(chǎn)品組分
      組分名稱(chēng)A液B液
      AP34L024(100 mL50 mL50 mL
      AP34L025500 mL250 mL250 mL
      運輸與保存
      藍冰運輸。4℃避光干燥保存,有效期12個(gè)月。
      使用方法
      1. 取出印記膜,加入合適的封閉液在溫室下孵育20~60 min,同時(shí)振蕩,以封閉膜上非特異性蛋白結合位點(diǎn)。

      2. 將膜從封閉液中取出,與一抗工作液在溫室孵育1 h,同時(shí)振蕩;或在28℃孵育過(guò)夜,不振蕩。

      3. 將足量的洗滌緩沖液加至膜上,保證緩沖液將膜*覆蓋。振蕩孵育≥5 min,更換洗滌緩沖液并重復該步驟4~6次。增加洗滌緩沖液體積,洗滌次數和洗滌時(shí)間有助于降低背景信號。【注】:①孵育前,膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會(huì )提高洗滌效率。②按前文建議的HRP標記二抗稀釋度非常重要的。

      4. HRP標記的二抗工作液與膜在溫室孵育1 h,同時(shí)振蕩。

      5. 重復步驟3,以除去未結合的HRP標記二抗。【注】:膜與HRP標記二抗孵育后必須進(jìn)行*洗滌。

      6. A溶液與B液等比例混合,制備成工作液。每cm2膜使用0.01~0.1 mL工作液,工作液可以在溫室下穩定8 h。
        【注】:露于日光或其他強光下可能損害工作液,為獲得最佳結果,將此工作液保存在琥珀色瓶中光;實(shí)驗室的常見(jiàn)照明不會(huì )損害工作液。

      7. 將印記膜在工作液中孵育5 min。從工作液中取出印記膜,并置于一個(gè)塑料片或清潔的塑料紙(膜)中,用一張吸水紙吸除多余的液體,并從印記和塑料紙之間小心地壓出氣泡。

      8. 將包在塑料紙(膜)中的印記膜置于膠片暗盒中,蛋白質(zhì)面朝上,除適用于膠片曝光的燈(如紅色安全燈)之外,關(guān)閉所有的燈。
        【注】:①膠片必須在曝光期間保持干燥;②確保將多余的底物從膜和塑料紙上*去除;在整個(gè)膠片處理期間,使用手套。

      9. X光膠片置于膜的上面。建議第一次曝光60 s。之后可調整曝光時(shí)間以達到最佳結果?;瘜W(xué)發(fā)光反應在底物孵育后的前5~30 min期間是強烈的。這一反應可以持續幾個(gè)小時(shí),但強度會(huì )隨時(shí)間下降,如有底物孵育后較長(cháng)時(shí)間后曝光,曝光時(shí)間可能需要延長(cháng)以獲得較強信號。如果使用磷光存儲成像設備(如Bio-Rad的分子成像儀系統)或CCD照相機可能需要較長(cháng)的曝光時(shí)間。
        【注】:膠片與膜之間的任何移動(dòng)可能在膠片上造成人為的非特異信號。

      10. 使用合適的顯影劑和定影劑對膠片進(jìn)行顯影。如果信號太強,則縮短曝光時(shí)間或將印記膜進(jìn)行剝離并降低抗體濃度重新檢測。

      注意事項
      1. 產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

      2. 為獲得最佳效果,必須優(yōu)化該系統的全部組分,包括樣品量、一抗和二抗濃度以及膜和封閉試劑的類(lèi)型。

      3. 使用產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請進(jìn)行一次系統的點(diǎn)印跡分析。

      4. 沒(méi)有一種封閉試劑對所有系統而言都是最佳的,所以為每一個(gè)免疫印跡檢測系統找到最合適的封閉緩沖液非常必需。封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應,導致出現非特異性信號。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì )影響系統的靈敏性。當從一種底物轉換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì )出現信號衰減或背景增加的現象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統。

      5. 使用親和素/生*素檢測系統時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因為牛奶中含有不定量的內源性生*素,會(huì )導致高背景信號。

      6. 保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗過(guò)程中印跡膜*被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號。

      7. 為獲得最佳效果,在孵育步驟請使用搖床。

      8. Tween20(終濃度0.05~0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號。使用高品質(zhì)的產(chǎn)品,如去污劑。它保存在安瓿中,過(guò)氧化物和其他雜質(zhì)含量很低。

      9. 不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑。疊氮鈉是HRP的抑制。

      10. 避免手與膜直接接觸,實(shí)驗過(guò)程應戴手套或使用干凈的鑷子。

      11. 所有設備必須清潔且不沾染外來(lái)物質(zhì)。金屬器械(如剪刀)不得具有可見(jiàn)的銹跡。銹跡可能導致斑點(diǎn)形成和高背景。

      12. 底物工作液在室溫下可穩定8 h。日光或任何其他強光下可能損害底物,為獲得最佳結果,將底物工作液保存在琥珀色瓶中,并避免長(cháng)期暴漏在任何強光下,短時(shí)間暴漏于實(shí)驗室常規照明不會(huì )損害該工作液。

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